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人(ren)血纖蛋白原(Fbg)試劑盒含量是固相夾心法酶(mei)(mei)聯免(mian)疫吸附實驗(yan)（ELISA）.已知待(dai)(dai)測(ce)物(wu)質(zhi)濃度的(de)(de)標準(zhun)品(pin)、未知濃度的(de)(de)樣(yang)品(pin)加(jia)入微孔酶(mei)(mei)標板內進行(xing)檢測(ce)。先(xian)將待(dai)(dai)測(ce)物(wu)質(zhi)和(he)生物(wu)素(su)標記(ji)的(de)(de)抗體同時(shi)溫育。洗滌后，加(jia)入親(qin)和(he)素(su)標記(ji)過(guo)的(de)(de)HRP。再(zai)經過(guo)溫育和(he)洗滌，去除未結(jie)合(he)的(de)(de)酶(mei)(mei)結(jie)合(he)物(wu)，然(ran)后加(jia)入底物(wu)A、B，和(he)酶(mei)(mei)結(jie)合(he)物(wu)同時(shi)作用(yong)。產生顏(yan)色(se)。顏(yan)色(se)的(de)(de)深淺和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)待(dai)(dai)測(ce)物(wu)質(zhi)的(de)(de)濃度呈比例關系。

試劑盒(he)組成：

試劑盒組成	48孔配置	96孔配置	保存
說明書	1份	1份
封板膜	2片（48）	2片（96）
密封袋	1個	1個
酶標包被板	1×48	1×96	2-8℃保存
標準品	0.5ml×1瓶	0.5ml×1瓶	2-8℃保存
標準品稀釋液	1.5ml×1瓶	1.5ml×1瓶	2-8℃保存
酶標試劑	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
樣品稀釋液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑A液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
顯色劑B液	3 ml×1瓶	6 ml×1瓶	2-8℃保存
終止液	3ml×1瓶	6ml×1瓶	2-8℃保存
濃縮洗滌液	（20ml×20倍）×1瓶	（20ml×30倍）×1瓶	2-8℃保存

注：標準品用標準品稀釋液依次做倍比稀釋
標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟:
1.加樣：標準品設定5個濃度點10個孔，每個濃度設定平行孔，加入50微升不同濃度的標準品，空白孔設定1個孔加入50微升蒸餾水（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔，在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
2.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
3.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
4.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
5.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
6.溫育：操作同2。
7.洗滌：操作同4。
8.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
9.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
10.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項：
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
11.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。
計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋
倍數，即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。
2.批內與批間應分別小于9%和11%
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月