人雌激素誘導蛋白(PS2)酶聯免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
實驗原理：
人雌激素誘導蛋(dan)白(PS2)試劑盒含(han)量是固相夾心(xin)法酶聯(lian)免疫(yi)吸附實驗(yan)（ELISA）.已知待測(ce)物(wu)質(zhi)濃度(du)(du)的(de)(de)(de)(de)(de)標(biao)準品、未知濃度(du)(du)的(de)(de)(de)(de)(de)樣品加入微孔酶標(biao)板內進行檢測(ce)。先將待測(ce)物(wu)質(zhi)和生物(wu)素標(biao)記的(de)(de)(de)(de)(de)抗體同(tong)時溫(wen)育。洗滌后，加入親和素標(biao)記過的(de)(de)(de)(de)(de)HRP。再經過溫(wen)育和洗滌，去除未結(jie)合的(de)(de)(de)(de)(de)酶結(jie)合物(wu)，然后加入底物(wu)A、B，和酶結(jie)合物(wu)同(tong)時作用。產生顏色(se)。顏色(se)的(de)(de)(de)(de)(de)深淺和樣品中(zhong)待測(ce)物(wu)質(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)濃度(du)(du)呈比例關系。
試劑盒組成：
|
試劑盒組成
|
48孔配置
|
96孔配置
|
保存
|
|
說明書
|
1份
|
1份
|
|
|
封板膜
|
2片（48）
|
2片（96）
|
|
|
密封袋
|
1個
|
1個
|
|
|
酶標包被板
|
1×48
|
1×96
|
2-8℃保存
|
|
標準品
|
0.5ml×1瓶
|
0.5ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
標準品稀釋液
|
1.5ml×1瓶
|
1.5ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
酶標試劑
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
樣品稀釋液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
顯色劑A液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
顯色劑B液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
終止液
|
3ml×1瓶
|
6ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
濃縮洗滌液
|
（20ml×20倍）×1瓶
|
（20ml×30倍）×1瓶
|
2-8℃保存
|
注：標(biao)準(zhun)品用標(biao)準(zhun)品稀(xi)(xi)釋(shi)液依(yi)次做倍比(bi)稀(xi)(xi)釋(shi)
標本要求：
1．標(biao)本采(cai)集后(hou)盡早進(jin)行(xing)(xing)提(ti)取，提(ti)取按相關(guan)文獻進(jin)行(xing)(xing)，提(ti)取后(hou)應(ying)盡快進(jin)行(xing)(xing)實驗(yan)。若不(bu)能馬上進(jin)行(xing)(xing)試驗(yan)，可將標(biao)本放于(yu)-20℃保存，但應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融
2．不能檢測(ce)含NaN3的樣品，因(yin)NaN3抑制辣根過(guo)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟:
1.加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)：標(biao)(biao)準(zhun)品設(she)定5個(ge)濃(nong)(nong)度點10個(ge)孔(kong)(kong)(kong)，每個(ge)濃(nong)(nong)度設(she)定平行(xing)孔(kong)(kong)(kong)，加(jia)(jia)入50微升不(bu)同(tong)(tong)濃(nong)(nong)度的標(biao)(biao)準(zhun)品，空(kong)白孔(kong)(kong)(kong)設(she)定1個(ge)孔(kong)(kong)(kong)加(jia)(jia)入50微升蒸餾水(shui)（空(kong)白對照孔(kong)(kong)(kong)不(bu)加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)品及酶(mei)標(biao)(biao)試劑，其余各步操作相同(tong)(tong)）、待測樣(yang)(yang)(yang)品孔(kong)(kong)(kong)，在(zai)酶(mei)標(biao)(biao)包被板(ban)上(shang)待測樣(yang)(yang)(yang)品孔(kong)(kong)(kong)中先加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)品稀(xi)(xi)釋液(ye)40μl，然后再加(jia)(jia)待測樣(yang)(yang)(yang)品10μl（樣(yang)(yang)(yang)品最(zui)終稀(xi)(xi)釋度為5倍）。加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)將樣(yang)(yang)(yang)品加(jia)(jia)于酶(mei)標(biao)(biao)板(ban)孔(kong)(kong)(kong)底部，盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)(kong)(kong)壁(bi)，輕輕晃動混勻。
2.溫育(yu)(yu)：用封板(ban)膜(mo)封板(ban)后置37℃溫育(yu)(yu)30分鐘(zhong)。
3.配(pei)液：將30（48T的(de)20倍(bei)(bei)）倍(bei)(bei)濃縮洗滌液用蒸(zheng)餾水(shui)30（48T的(de)20倍(bei)(bei)）倍(bei)(bei)稀釋后備用。
4.洗滌：小(xiao)心揭掉封板膜，棄(qi)去液體，甩(shuai)干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄(qi)去，如此重(zhong)復5次，拍干。
5.加(jia)酶：每孔加(jia)入酶標(biao)試劑50μl，空白孔除外(wai)。
6.溫(wen)育：操(cao)作(zuo)同3。
7.洗滌：操作同5。
8.顯(xian)色(se)(se)：每孔先加入顯(xian)色(se)(se)劑A50μl，再加入顯(xian)色(se)(se)劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻(yun)，37℃避光顯(xian)色(se)(se)15分鐘(zhong).
9.終止(zhi)：每孔加(jia)終止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應（此時藍色(se)立(li)轉黃色(se)）。
10.測定：以空白空調零，450nm波長(chang)依序測量各(ge)孔的(de)吸光度（OD值(zhi)）。測定應在加終止液后15分鐘(zhong)以內進行。
注意事項：
1．試劑盒從冷藏(zang)環境中取出(chu)應在室溫平衡(heng)15-30分鐘(zhong)后方可使用，酶標包(bao)被板開(kai)封后如未用完(wan)，板條應裝入密封袋中保(bao)存(cun)。
2．濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可能會有結(jie)晶析出，稀釋時可在(zai)水(shui)浴中加(jia)溫助溶，洗(xi)滌時不(bu)影響結(jie)果。
3．各步加樣(yang)均應使(shi)用加樣(yang)器，并經常(chang)校(xiao)對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣(yang)時間(jian)最好(hao)控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦(jian)使(shi)用排(pai)槍加樣(yang)。
4．請每次(ci)測(ce)定的同時(shi)做標準曲線，最好做復孔(kong)。如標本中(zhong)待測(ce)物(wu)質含(han)量過高(gao)（樣本OD值大于(yu)標準品孔(kong)第一孔(kong)的OD值），請先用樣品稀釋液(ye)稀釋一定倍(bei)數(shu)（n倍(bei)）后再測(ce)定，計算時(shi)請最后乘以總稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。
5．封板膜只限一(yi)次性使用，以避(bi)免交叉(cha)污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格(ge)按(an)照說明書的操作進行，試驗(yan)結(jie)果(guo)判定必(bi)須以酶標(biao)儀(yi)讀數為準(zhun).
8．所有樣品，洗滌(di)液和各種(zhong)廢(fei)棄物(wu)都應(ying)按(an)傳染物(wu)處理(li)。
9．本試劑不同批號組分(fen)不得混(hun)用(yong)。
11.如與英(ying)文說(shuo)明書有異，以英(ying)文說(shuo)明書為準(zhun)。
計算：
以(yi)標準(zhun)物的濃(nong)度為橫坐(zuo)(zuo)標，OD值為縱坐(zuo)(zuo)標，在(zai)坐(zuo)(zuo)標紙(zhi)上繪(hui)出標準(zhun)曲線(xian)，根據樣(yang)品的OD
值(zhi)由標準曲線(xian)查(cha)出(chu)相應的濃度(du)；再乘以(yi)稀釋倍數；或(huo)用標準物的濃度(du)與OD值(zhi)計算(suan)出(chu)標
準曲線的(de)直線回歸方程(cheng)式(shi)，將樣品的(de)OD值(zhi)代入方程(cheng)式(shi)，計算出樣品濃(nong)度(du)，再(zai)乘(cheng)以稀釋
倍數，即(ji)為(wei)樣(yang)品的(de)實(shi)際濃度。
試劑盒性能：
1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guan)系數R值為0.990以上。
2.批(pi)內與批(pi)間應分別小于9%和11%
保存條件及有效期：
1.試劑盒(he)保存：；2-8℃。
2．有(you)效(xiao)期：6個月
購物車
點擊咨詢
2505646471
400-8830-979 