斑馬魚白介素1（IL-1）酶聯免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
實驗原理：
斑馬(ma)魚(yu)白介素1（IL-1）試劑盒(he)含(han)量是固相夾心法(fa)酶(mei)聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知待(dai)測(ce)物(wu)(wu)質(zhi)濃度的(de)(de)標準(zhun)品、未知濃度的(de)(de)樣(yang)品加入微(wei)孔酶(mei)標板內進行檢測(ce)。先將待(dai)測(ce)物(wu)(wu)質(zhi)和(he)(he)(he)生(sheng)物(wu)(wu)素標記的(de)(de)抗體同(tong)時溫育(yu)。洗(xi)滌后(hou)，加入親和(he)(he)(he)素標記過的(de)(de)HRP。再經(jing)過溫育(yu)和(he)(he)(he)洗(xi)滌，去除未結(jie)合的(de)(de)酶(mei)結(jie)合物(wu)(wu)，然后(hou)加入底物(wu)(wu)A、B，和(he)(he)(he)酶(mei)結(jie)合物(wu)(wu)同(tong)時作用。產生(sheng)顏色。顏色的(de)(de)深淺和(he)(he)(he)樣(yang)品中(zhong)待(dai)測(ce)物(wu)(wu)質(zhi)的(de)(de)濃度呈(cheng)比例關系。
試劑盒組成：
|
試劑盒組成
|
48孔配置
|
96孔配置
|
保存
|
|
說明書
|
1份
|
1份
|
|
|
封板膜
|
2片（48）
|
2片（96）
|
|
|
密封袋
|
1個
|
1個
|
|
|
酶標包被板
|
1×48
|
1×96
|
2-8℃保存
|
|
標準品
|
0.5ml×1瓶
|
0.5ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
標準品稀釋液
|
1.5ml×1瓶
|
1.5ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
酶標試劑
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
樣品稀釋液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
顯色劑A液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
顯色劑B液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
終止液
|
3ml×1瓶
|
6ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
濃縮洗滌液
|
（20ml×20倍）×1瓶
|
（20ml×30倍）×1瓶
|
2-8℃保存
|
注：標(biao)準(zhun)品用標(biao)準(zhun)品稀釋液依次做倍(bei)比(bi)稀釋
標本要求：
1．標本采集后(hou)盡早進(jin)行(xing)(xing)提取(qu)，提取(qu)按相關文獻進(jin)行(xing)(xing)，提取(qu)后(hou)應(ying)盡快進(jin)行(xing)(xing)實驗(yan)。若(ruo)不能馬(ma)上進(jin)行(xing)(xing)試(shi)驗(yan)，可將標本放于(yu)-20℃保存，但應(ying)避(bi)免反復(fu)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品(pin)，因(yin)NaN3抑制辣根過氧化(hua)物(wu)酶的（HRP）活性。
操作步驟:
1.加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)：標準(zhun)品(pin)設(she)定5個(ge)(ge)濃(nong)度(du)點(dian)10個(ge)(ge)孔(kong)，每個(ge)(ge)濃(nong)度(du)設(she)定平(ping)行(xing)孔(kong)，加(jia)(jia)入50微升不(bu)同濃(nong)度(du)的標準(zhun)品(pin)，空白孔(kong)設(she)定1個(ge)(ge)孔(kong)加(jia)(jia)入50微升蒸餾水（空白對照孔(kong)不(bu)加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)及酶標試(shi)劑，其(qi)余(yu)各步操作相同）、待(dai)(dai)測樣(yang)(yang)(yang)品(pin)孔(kong)，在酶標包被板上(shang)待(dai)(dai)測樣(yang)(yang)(yang)品(pin)孔(kong)中先加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)品(pin)稀釋液40μl，然后(hou)再加(jia)(jia)待(dai)(dai)測樣(yang)(yang)(yang)品(pin)10μl（樣(yang)(yang)(yang)品(pin)最終稀釋度(du)為5倍(bei)）。加(jia)(jia)樣(yang)(yang)(yang)將樣(yang)(yang)(yang)品(pin)加(jia)(jia)于酶標板孔(kong)底部(bu)，盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)壁，輕輕晃動(dong)混勻。
2.溫(wen)(wen)育：用封板膜(mo)封板后(hou)置(zhi)37℃溫(wen)(wen)育30分鐘。
3.配液：將30（48T的20倍(bei)(bei)）倍(bei)(bei)濃縮洗滌(di)液用蒸餾(liu)水(shui)30（48T的20倍(bei)(bei)）倍(bei)(bei)稀釋后備用。
4.洗滌(di)：小心揭掉封板膜，棄去液(ye)體，甩干，每(mei)孔加滿洗滌(di)液(ye)，靜(jing)置30秒后棄去，如此重(zhong)復5次，拍(pai)干。
5.加(jia)酶：每孔加(jia)入酶標試劑50μl，空白孔除外。
6.溫育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)2。
7.洗滌(di)：操作同4。
8.顯(xian)(xian)色：每孔先加(jia)入(ru)顯(xian)(xian)色劑A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)(xian)色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻，37℃避(bi)光顯(xian)(xian)色15分鐘.
9.終(zhong)止：每孔加終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反(fan)應（此時藍色立轉黃色）。
10.測(ce)定(ding)：以空白空調零，450nm波長依(yi)序(xu)測(ce)量各孔的吸光度（OD值(zhi)）。測(ce)定(ding)應(ying)在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項：
1．試(shi)劑盒從冷藏環境中(zhong)取(qu)出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被(bei)板開封后如未用完(wan)，板條應裝(zhuang)入密(mi)封袋中(zhong)保存(cun)。
2．濃洗滌(di)液可能會有結晶析出，稀釋時可在(zai)水(shui)浴中加溫(wen)助溶，洗滌(di)時不影響結果(guo)。
3．各步(bu)加樣均應使用加樣器，并經常校(xiao)對其(qi)準確性，以避免試驗誤(wu)差(cha)。一次加樣時間最好控制在5分(fen)鐘(zhong)內，如標本數量(liang)多，推薦使用排槍加樣。
4．請(qing)(qing)每次測(ce)(ce)定的同時做標(biao)(biao)準曲線(xian)，最(zui)好做復(fu)孔。如標(biao)(biao)本中待測(ce)(ce)物質(zhi)含量過(guo)高（樣本OD值大于標(biao)(biao)準品(pin)孔第一(yi)孔的OD值），請(qing)(qing)先用樣品(pin)稀(xi)釋(shi)(shi)液稀(xi)釋(shi)(shi)一(yi)定倍數（n倍）后再測(ce)(ce)定，計算(suan)時請(qing)(qing)最(zui)后乘以總稀(xi)釋(shi)(shi)倍數（×n×5）。
5．封板(ban)膜只限一次(ci)性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光(guang)保(bao)存(cun)。
7．嚴格按(an)照說明書的(de)操作(zuo)進(jin)行，試驗結果判定必(bi)須以酶標儀(yi)讀數(shu)為準(zhun).
8．所(suo)有樣品，洗滌液(ye)和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不(bu)同批號組(zu)分不(bu)得混用。
11.如與英文說明(ming)書有異，以英文說明(ming)書為準(zhun)。
計算：
以標準(zhun)物的濃(nong)度為(wei)橫(heng)坐(zuo)標，OD值為(wei)縱坐(zuo)標，在坐(zuo)標紙上繪出(chu)標準(zhun)曲線，根據(ju)樣品(pin)的OD
值由標準(zhun)曲線查出相應的濃度(du)(du)；再乘(cheng)以稀釋倍數；或用標準(zhun)物(wu)的濃度(du)(du)與OD值計(ji)算出標
準曲線的(de)直線回歸方(fang)程(cheng)(cheng)式，將樣品的(de)OD值代入方(fang)程(cheng)(cheng)式，計算出樣品濃(nong)度，再(zai)乘(cheng)以稀釋
倍數，即為(wei)樣品的實際濃度。
試劑(ji)盒性能：
1.樣品線性(xing)回歸(gui)與預期(qi)濃度相關系數R值為0.990以上(shang)。
2.批(pi)內與(yu)批(pi)間應分(fen)別小于9%和(he)11%
保存條件及有(you)效期：
1.試劑盒(he)保存：；2-8℃。
2．有(you)效期：6個月
購物車
點擊咨詢
2505646471
400-8830-979 