大鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)酶聯免疫分析（ELISA）
試劑盒使用說明書
實驗原理：
大鼠(shu)纖溶酶(mei)抗纖溶酶(mei)復(fu)合(he)物(PAP)試劑盒含量是固相夾心(xin)法酶(mei)聯免(mian)疫吸附實驗（ELISA）.已知待(dai)(dai)測(ce)物質濃度的(de)(de)標(biao)準品、未知濃度的(de)(de)樣品加(jia)入(ru)微孔酶(mei)標(biao)板(ban)內(nei)進(jin)行檢(jian)測(ce)。先將待(dai)(dai)測(ce)物質和生(sheng)物素標(biao)記(ji)的(de)(de)抗體同時溫育(yu)。洗滌(di)后，加(jia)入(ru)親和素標(biao)記(ji)過(guo)的(de)(de)HRP。再經過(guo)溫育(yu)和洗滌(di)，去除未結(jie)合(he)的(de)(de)酶(mei)結(jie)合(he)物，然后加(jia)入(ru)底物A、B，和酶(mei)結(jie)合(he)物同時作(zuo)用。產生(sheng)顏色(se)。顏色(se)的(de)(de)深淺和樣品中待(dai)(dai)測(ce)物質的(de)(de)濃度呈比例(li)關系。
試劑盒組成：
|
試劑盒組成
|
48孔配置
|
96孔配置
|
保存
|
|
說明書
|
1份
|
1份
|
|
|
封板膜
|
2片（48）
|
2片（96）
|
|
|
密封袋
|
1個
|
1個
|
|
|
酶標包被板
|
1×48
|
1×96
|
2-8℃保存
|
|
標準品
|
0.5ml×1瓶
|
0.5ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
標準品稀釋液
|
1.5ml×1瓶
|
1.5ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
酶標試劑
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
樣品稀釋液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
顯色劑A液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
顯色劑B液
|
3 ml×1瓶
|
6 ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
終止液
|
3ml×1瓶
|
6ml×1瓶
|
2-8℃保存
|
|
濃縮洗滌液
|
（20ml×20倍）×1瓶
|
（20ml×30倍）×1瓶
|
2-8℃保存
|
注：標(biao)準品用(yong)標(biao)準品稀釋液依(yi)次做倍比稀釋
標本要求：
1．標本(ben)采集后(hou)盡早進(jin)行(xing)提取(qu)，提取(qu)按相關(guan)文獻(xian)進(jin)行(xing)，提取(qu)后(hou)應(ying)(ying)盡快進(jin)行(xing)實驗。若不能馬上進(jin)行(xing)試驗，可將標本(ben)放于-20℃保存(cun)，但(dan)應(ying)(ying)避免反(fan)復凍融
2．不能(neng)檢測含NaN3的(de)(de)樣品，因NaN3抑制辣(la)根(gen)過氧化物酶的(de)(de)（HRP）活性。
操作步驟:
1.加樣(yang)(yang)：標(biao)準品(pin)(pin)(pin)設定5個濃(nong)度(du)點10個孔(kong)，每個濃(nong)度(du)設定平行孔(kong)，加入50微升不同濃(nong)度(du)的標(biao)準品(pin)(pin)(pin)，空白孔(kong)設定1個孔(kong)加入50微升蒸餾水（空白對(dui)照孔(kong)不加樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)及(ji)酶標(biao)試劑，其余(yu)各步(bu)操作(zuo)相同）、待(dai)測(ce)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)孔(kong)，在酶標(biao)包被板(ban)上待(dai)測(ce)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)孔(kong)中(zhong)先加樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)稀釋(shi)液40μl，然后再加待(dai)測(ce)樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)10μl（樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)最終稀釋(shi)度(du)為5倍）。加樣(yang)(yang)將樣(yang)(yang)品(pin)(pin)(pin)加于酶標(biao)板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動混勻。
2.溫育(yu)：用封板膜封板后(hou)置37℃溫育(yu)30分鐘。
3.配液：將30（48T的20倍(bei)）倍(bei)濃縮洗滌液用(yong)(yong)蒸餾水30（48T的20倍(bei)）倍(bei)稀釋后備用(yong)(yong)。
4.洗滌：小心揭掉(diao)封板膜，棄(qi)去液體，甩干，每孔加(jia)滿(man)洗滌液，靜置30秒后棄(qi)去，如此(ci)重復5次，拍干。
5.加(jia)酶(mei)：每孔加(jia)入酶(mei)標(biao)試劑50μl，空白孔除外。
6.溫育：操作同2。
7.洗滌：操作同4。
8.顯色(se)：每孔先加入(ru)顯色(se)劑A50μl，再加入(ru)顯色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩混勻，37℃避(bi)光顯色(se)15分鐘.
9.終止：每孔(kong)加終止液50μl，終止反(fan)應(ying)（此時藍色(se)立轉黃色(se)）。
10.測(ce)定(ding)：以空(kong)白(bai)空(kong)調零，450nm波長依序測(ce)量(liang)各孔的(de)吸光度（OD值(zhi)）。測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加終止液(ye)后15分鐘以內進行。
注意事項：
1．試劑盒從冷藏環境(jing)中(zhong)取出應(ying)在(zai)室溫平衡15-30分鐘(zhong)后方可使用(yong)，酶標(biao)包被板開(kai)封后如未(wei)用(yong)完(wan)，板條應(ying)裝入密封袋中(zhong)保存。
2．濃洗(xi)滌液可(ke)能會(hui)有結(jie)晶析出(chu)，稀釋時可(ke)在水浴中加溫(wen)助溶，洗(xi)滌時不(bu)影響結(jie)果。
3．各步加樣(yang)(yang)均應使用(yong)加樣(yang)(yang)器，并(bing)經常校對其準(zhun)確性，以(yi)避免試(shi)驗(yan)誤差。一次加樣(yang)(yang)時間最好(hao)控制在5分鐘內，如標(biao)本(ben)數量多(duo)，推薦使用(yong)排槍(qiang)加樣(yang)(yang)。
4．請每次測(ce)(ce)定的(de)同時做(zuo)標準曲線，最好做(zuo)復孔(kong)(kong)。如標本中待(dai)測(ce)(ce)物質含量過高（樣(yang)(yang)本OD值大于標準品孔(kong)(kong)第一孔(kong)(kong)的(de)OD值），請先(xian)用樣(yang)(yang)品稀釋(shi)液稀釋(shi)一定倍數（n倍）后(hou)再(zai)測(ce)(ce)定，計算時請最后(hou)乘(cheng)以總稀釋(shi)倍數（×n×5）。
5．封板(ban)膜(mo)只限(xian)一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請(qing)避光(guang)保存。
7．嚴格按照(zhao)說明書(shu)的操作進(jin)行，試(shi)驗結果判定必須(xu)以(yi)酶標儀讀數(shu)為準.
8．所有樣品，洗滌(di)液(ye)和各種廢(fei)棄物(wu)都應按傳染物(wu)處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
11.如與(yu)英(ying)文(wen)說(shuo)明書(shu)有異，以(yi)英(ying)文(wen)說(shuo)明書(shu)為準(zhun)。
計算：
以標(biao)準物的(de)濃度為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)，OD值(zhi)為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，在坐(zuo)標(biao)紙(zhi)上(shang)繪出(chu)標(biao)準曲線，根據樣品的(de)OD
值由標準曲線查(cha)出相(xiang)應(ying)的濃度；再乘以稀釋倍(bei)數；或用標準物(wu)的濃度與(yu)OD值計算(suan)出標
準曲(qu)線的(de)直線回歸方程式(shi)(shi)，將樣品的(de)OD值代入方程式(shi)(shi)，計算出樣品濃度，再乘以稀(xi)釋(shi)
倍數(shu)，即為樣品的實(shi)際濃度。
試(shi)劑(ji)盒性能：
1.樣(yang)品線性回歸與預期濃(nong)度相關系(xi)數(shu)R值為0.990以上。
2.批(pi)內與批(pi)間應分(fen)別(bie)小(xiao)于(yu)9%和(he)11%
保(bao)存條件及(ji)有效期：
1.試(shi)劑盒(he)保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
購物車
點擊咨詢
2505646471
400-8830-979 