分光(guang)光(guang)度計是利用物質對光的選擇性吸收的特性，以較純的單色光作為入射光，測定物質對光的吸收，從而物質進行定性或定量分析的儀器。在使用過程中常常會出現測量誤差，這些誤差又是如何產生的呢？

1、復色光對比耳定律的偏離

       比耳定律(lv)成立的(de)前提(ti)條件是(shi)人(ren)射(she)光(guang)(guang)是(shi)單色(se)(se)光(guang)(guang)，但(dan)是(shi)精(jing)度再高的(de)儀器，即使是(shi)雙單色(se)(se)器的(de)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)，也只能獲得(de)近乎單色(se)(se)的(de)光(guang)(guang)，無法獲得(de)純單色(se)(se)光(guang)(guang)，它仍(reng)然含有狹窄光(guang)(guang)通帶，具有復色(se)(se)光(guang)(guang)的(de)性質。而復色(se)(se)光(guang)(guang)會(hui)導致比耳定律(lv)的(de)正或負偏離。

        固定狹縫(feng)的紫外(wai)分光光度(du)計光譜帶寬一般為1nm或(huo)2nm，可調狹(xia)縫的可以做到0.1nm；可(ke)見分光(guang)光(guang)度(du)計帶寬6nm、8nm，甚至十幾納米。

        光(guang)(guang)譜帶(dai)寬應該是越(yue)小(xiao)越(yue)好，但(dan)是隨著光(guang)(guang)譜分辨率的提高(gao)，儀器的靈敏度(du)降低(di)，所(suo)以選擇儀器時要綜合考慮各種條件(jian)的影響。當溶液(ye)濃(nong)度(du)較小(xiao)且單色光(guang)(guang)較純時，可近似認為符合比耳定律。

2、雜散光的影響

        雜散光(guang)是指進人(ren)檢測(ce)器的處于(yu)待測(ce)波(bo)長(chang)光(guang)譜(pu)帶(dai)寬(kuan)范圍外(wai)的其他波(bo)長(chang)組分，它是光(guang)譜(pu)測(ce)量中誤差的主要來源。

        產生原因(yin)有:分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)(ji)的色(se)(se)散(san)元件、反射(she)鏡、透鏡及單色(se)(se)器(qi)內壁灰(hui)塵(chen)等。在(zai)分(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計(ji)(ji)工(gong)作波(bo)段邊緣波(bo)長(chang)處，由(you)于單色(se)(se)器(qi)透光(guang)(guang)率、光(guang)(guang)源輻射(she)強(qiang)度、檢(jian)測器(qi)靈敏度都(dou)較低(di)，雜(za)散(san)光(guang)(guang)的影(ying)響更(geng)為顯著(zhu)。

        雜(za)散光(guang)限制(zhi)儀器的(de)分析(xi)上(shang)限可引起嚴重的(de)測(ce)量(liang)(liang)誤差，實際工(gong)作中，在定量(liang)(liang)分析(xi)時，一般在吸收峰或其附近處(chu)測(ce)量(liang)(liang)樣品吸光(guang)度(du)，如果在分析(xi)波長處(chu)含有(you)雜(za)散光(guang)，這時樣品的(de)透光(guang)率(lv)較小，而(er)雜(za)散光(guang)大部分透過，使(shi)測(ce)量(liang)(liang)吸光(guang)度(du)低于真實吸光(guang)度(du)。

3、儀器噪聲對測定的影響

        儀(yi)器噪聲也是儀(yi)器的(de)(de)(de)一(yi)個重(zhong)要(yao)指標(biao)，它表征儀(yi)器做稀溶液的(de)(de)(de)能力。是疊加在待(dai)測量的(de)(de)(de)分析(xi)信(xin)(xin)號中的(de)(de)(de)不需要(yao)的(de)(de)(de)信(xin)(xin)號，掃描100%T和(he)0%T線，可觀察(cha)到分光光度計的絕對噪聲(sheng)水平，如果儀器噪聲(sheng)較大，會掩(yan)蓋較小的測量信號(hao)，一般用噪音(yin)的二(er)倍來表示儀器的靈敏度。

4、波長和吸光度準確度

        樣(yang)品的每一(yi)個值都(dou)是(shi)在一(yi)定(ding)(ding)的波長(chang)(chang)下測(ce)得的，如果波長(chang)(chang)誤差很(hen)大(da)，測(ce)出的值肯定(ding)(ding)不準。吸光(guang)度準確度也是(shi)用戶對儀(yi)器的直接要求，更應引起足(zu)夠的重視。

國家計量檢定(ding)規(gui)程(cheng)規(gui)定(ding)雙光(guang)束紫外可(ke)見分光(guang)光(guang)度計透(tou)射比準(zhun)確度為A級士0.6%，B級土1.0%。

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