皮膚(fu)癌(ai)是(shi)發病率較高(gao)、較為常見的(de)癌(ai)癥(zheng)類(lei)型之一(yi)，而在眾(zhong)多的(de)皮膚(fu)癌(ai)類(lei)型中，黑(hei)素(su)瘤(liu)(liu)(liu)是(shi)最危險的(de)一(yi)種。據世(shi)界衛生組織(WHO)估(gu)計，每年因(yin)黑(hei)素(su)瘤(liu)(liu)(liu)而死亡的(de)患者數量達65,000例。其中約(yue)95%的(de)黑(hei)素(su)瘤(liu)(liu)(liu)都是(shi)因(yin)皮膚(fu)暴露于(yu)紫(zi)外(wai)線輻照下引發的(de)。正是(shi)由于(yu)紫(zi)外(wai)線對皮膚(fu)的(de)巨大殺傷作用，防(fang)曬霜對于(yu)使(shi)用者而言，其意義(yi)不僅(jin)僅(jin)是(shi)防(fang)止曬黑(hei)，更擁有降低黑(hei)素(su)瘤(liu)(liu)(liu)發病幾率的(de)重要意義(yi)。

市場上林林總總的(de)防(fang)曬(shai)霜產(chan)(chan)品大多通(tong)過(guo)添(tian)加能主動(dong)過(guo)濾(lv)紫外線輻射的(de)化(hua)學(xue)成分(fen)來實現“防(fang)曬(shai)”的(de)作用(yong)，如果(guo)(guo)化(hua)學(xue)成分(fen)含量(liang)不足，則會讓防(fang)曬(shai)效果(guo)(guo)大打折扣，“防(fang)曬(shai)”名不副(fu)實。然而如果(guo)(guo)長期接觸過(guo)量(liang)的(de)化(hua)學(xue)成分(fen)也(ye)可能增加皮(pi)膚對陽光過(guo)敏的(de)風險。因此(ci)，我(wo)國《化(hua)妝品衛生(sheng)標準》(GB7916-1987)明確規定了防(fang)曬(shai)產(chan)(chan)品添(tian)加的(de)相關化(hua)學(xue)成分(fen)的(de)含量(liang)。

對于化(hua)妝品(pin)生產(chan)商和監管機構(gou)、第(di)三方(fang)檢(jian)測機構(gou)而言，如(ru)果(guo)能(neng)夠同時(shi)檢(jian)測防曬霜配方(fang)中的(de)多種成分，能(neng)夠大大提升(sheng)其效率。在(zai)傳統(tong)的(de)檢(jian)測方(fang)法(fa)中，業(ye)界通常使用HPLC進行(xing)檢(jian)測，然而，由迄今(jin)為止已發表的(de)相關文(wen)獻可以看出，HPLC分析方(fang)法(fa)存在(zai)一(yi)些缺(que)點，例如(ru)會(hui)縮短HPLC級色譜柱的(de)使用壽命(ming)并且/或者需要使用有毒溶劑等。 

針(zhen)對這一(yi)(yi)需求，本(ben)文介(jie)紹(shao)了(le)一(yi)(yi)種(zhong)利用(yong)ACQUITY UPLC H-Class PLUS系(xi)(xi)統(tong)與UV和(he)(he)質譜(pu)檢測(ce)(ce)(ce)器(qi)聯(lian)用(yong)的方(fang)法，能夠在(zai)開發(fa)高(gao)效分(fen)(fen)(fen)(fen)離、檢測(ce)(ce)(ce)和(he)(he)定(ding)(ding)量(liang)分(fen)(fen)(fen)(fen)析防曬(shai)霜活性(xing)(xing)成分(fen)(fen)(fen)(fen)的分(fen)(fen)(fen)(fen)析方(fang)法時，準確記錄方(fang)法開發(fa)行(xing)(xing)為。我們分(fen)(fen)(fen)(fen)別在(zai)Waters ACQUITY UPLC H-Class PLUS和(he)(he)ACQUITY UPLC H-Class系(xi)(xi)統(tong)上(shang)使用(yong)兩種(zhong)色譜(pu)柱填(tian)料對含有六種(zhong)紫外線化學過濾劑(ji)的混合物進行(xing)(xing)分(fen)(fen)(fen)(fen)離和(he)(he)檢測(ce)(ce)(ce)，然(ran)后測(ce)(ce)(ce)定(ding)(ding)并(bing)比較(jiao)了(le)兩套系(xi)(xi)統(tong)的典型(xing)系(xi)(xi)統(tong)適(shi)應性(xing)(xing)參數，結(jie)果表明兩套系(xi)(xi)統(tong)性(xing)(xing)能相當。

解決方案

分(fen)析標準品(pin)購自(zi)Sigma-Aldrich Ltd(英(ying)國多塞特(te)郡普爾)。使(shi)(shi)用(yong)水(shui)：甲(jia)醇 (60:40)配制濃度為25 g/mL的標準品(pin)溶液(ye)，供UPLC分(fen)析使(shi)(shi)用(yong)。使(shi)(shi)用(yong)ACQUITY UPLC HSS PFP色(se)譜柱(1.8 m，2.1 x 50 mm，部件號：186005965)和(he)ACQUITY UPLC BEH C8色(se)譜柱(1.7 m, 2.1 x 50 mm，部件號：186002877)進行UPLC分(fen)離，流(liu)(liu)速為0.5 mL/min，使(shi)(shi)用(yong)通用(yong)梯度：初(chu)始為40% B保持1 min，4.5 min時增(zeng)加至95% B，隨后保持2.5 min，最后回到(dao)40% B，重新平(ping)衡1 min。流(liu)(liu)動相由A(水(shui))和(he)B(甲(jia)醇)組成，二者(zhe)均(jun)含0.1%甲(jia)酸(suan)，進樣體(ti)積為5 L。使(shi)(shi)用(yong)Empower 3 CDS軟件測(ce)定保留時間和(he)峰面積，并計(ji)算五(wu)次重復(fu)進樣的平(ping)均(jun)結果。

分(fen)別在(zai)(zai)ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系(xi)(xi)統(tong)上(shang)(shang)使(shi)用相同的(de)(de)(de)(de)流動相、梯度(du)和進樣體積(ji)，使(shi)用兩(liang)種(zhong)(zhong)色(se)譜(pu)柱(zhu)填(tian)料分(fen)析(xi)六種(zhong)(zhong)防(fang)曬霜活性成分(fen)。圖(tu)1是在(zai)(zai)兩(liang)套(tao)系(xi)(xi)統(tong)上(shang)(shang)使(shi)用ACQUITY UPLC BEH C8色(se)譜(pu)柱(zhu)分(fen)離六種(zhong)(zhong)化(hua)合物(wu)得到的(de)(de)(de)(de)色(se)譜(pu)圖(tu)。圖(tu)2是在(zai)(zai)兩(liang)套(tao)系(xi)(xi)統(tong)上(shang)(shang)使(shi)用ACQUITY UPLC HSS PFP色(se)譜(pu)柱(zhu)分(fen)離同樣的(de)(de)(de)(de)六種(zhong)(zhong)分(fen)析(xi)物(wu)得到的(de)(de)(de)(de)色(se)譜(pu)圖(tu)。如圖(tu)3所示，兩(liang)套(tao)系(xi)(xi)統(tong)分(fen)離所有(you)目(mu)標化(hua)合物(wu)得到的(de)(de)(de)(de)保留時間和峰面積(ji)都相當。以%RSD來(lai)衡量保留時間重(zhong)現性，ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系(xi)(xi)統(tong)的(de)(de)(de)(de)%RSD分(fen)別小(xiao)于0.2%和0.04%。以上(shang)(shang)數據表明分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)在(zai)(zai)ACQUITY UPLC H-Class和H-Class PLUS系(xi)(xi)統(tong)上(shang)(shang)均具有(you)良好的(de)(de)(de)(de)重(zhong)現性，因此，在(zai)(zai)ACQUITY UPLC H-Class系(xi)(xi)統(tong)上(shang)(shang)驗(yan)證(zheng)過(guo)的(de)(de)(de)(de)分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)可直接在(zai)(zai)ACQUITY UPLC H-Class PLUS系(xi)(xi)統(tong)上(shang)(shang)運(yun)行，無需進行重(zhong)新(xin)驗(yan)證(zheng)。

圖1. 分別在ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統上(shang)使用ACQUITY UPLC BEH C8色譜(pu)柱填料(liao)分離各種防曬霜活性成分標準品得到的疊加色譜(pu)圖。

圖2.分(fen)別在ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統上使(shi)用ACQUITY UPLC HSS PFP色(se)譜柱分(fen)離各種防曬(shai)霜(shuang)活性成分(fen)標(biao)準品得(de)到(dao)的(de)疊(die)加色(se)譜圖。

圖3. ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統的代表(biao)性保留時(shi)間和峰面積數據。

總結(jie)：ACQUITY UPLC H-Class PLUS系(xi)統(tong)是(shi)一種穩(wen)定可靠(kao)的(de)分析(xi)技術，可準(zhun)確(que)分析(xi)化妝品(pin)中的(de)防曬(shai)霜(shuang)活性成分。本系(xi)統(tong)具有卓(zhuo)越的(de)重現(xian)性，有助于生產(chan)商在防曬(shai)霜(shuang)生產(chan)的(de)QC監測中準(zhun)確(que)鑒別批(pi)次間的(de)差異。