近日，中(zhong)科院大連化學物理研(yan)究所(suo)許(xu)國旺研(yan)究員團隊在利用液相色譜-高分辨質(zhi)譜聯用技術(LC-HRMS)分析酰基肉堿的研(yan)究中(zhong)取得(de)新(xin)進展，研(yan)究結果在Analytical Chemistry雜志發(fa)表。

酰基(ji)肉(rou)堿(jian)是一類(lei)(lei)重(zhong)要(yao)(yao)的代(dai)謝物，在許多生(sheng)物過(guo)程中(zhong)發(fa)揮重(zhong)要(yao)(yao)作用，如脂肪酸的b-氧化代(dai)謝。由于不同長(chang)度(du)的酰基(ji)鏈和同分(fen)異構(gou)體的存(cun)在，酰基(ji)肉(rou)堿(jian)的種(zhong)(zhong)類(lei)(lei)繁多。已有的大多分(fen)析(xi)方法中(zhong)，可檢測(ce)到(dao)的酰基(ji)肉(rou)堿(jian)數(shu)常(chang)常(chang)幾十種(zhong)(zhong)。為了提高酰基(ji)肉(rou)堿(jian)的分(fen)析(xi)覆蓋度(du)， 該課題組建(jian)立了一種(zhong)(zhong)能分(fen)析(xi)700余種(zhong)(zhong)酰基(ji)肉(rou)堿(jian)的液相色譜(pu)(pu)-質譜(pu)(pu)方法。

首先，在(zai)全掃(sao)描(miao)/數(shu)據依賴的二(er)(er)級(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)譜數(shu)據采(cai)集模式(Full MS/ddMS2)下(xia)分(fen)析(xi)混合生物樣本，篩選出104個(ge)能產生酰(xian)基(ji)肉(rou)(rou)堿(jian)特(te)征碎片的母離子。根據精(jing)確質(zhi)(zhi)(zhi)量數(shu)和(he)分(fen)子式，將上述(shu)酰(xian)基(ji)肉(rou)(rou)堿(jian)按元(yuan)素組成(cheng)進(jin)行大(da)(da)類(lei)歸屬。然后在(zai)各大(da)(da)類(lei)中(zhong)(zhong)計算每一(yi)個(ge)酰(xian)基(ji)肉(rou)(rou)堿(jian)理(li)論質(zhi)(zhi)(zhi)荷比(bi)，并(bing)用于在(zai)全掃(sao)描(miao)數(shu)據中(zhong)(zhong)的色譜峰(feng)提取，共(gong)(gong)發現298個(ge)酰(xian)基(ji)肉(rou)(rou)堿(jian)母離子，作為第(di)二(er)(er)步靶向采(cai)集的基(ji)礎。進(jin)一(yi)步地，在(zai)全掃(sao)描(miao)結合平(ping)行反應(ying)監測模式(Full MS +PRM)下(xia)， 在(zai)混合樣本中(zhong)(zhong)對298個(ge)母離子進(jin)行靶向二(er)(er)級(ji)(ji)分(fen)析(xi)，得(de)到其高分(fen)辨二(er)(er)級(ji)(ji)質(zhi)(zhi)(zhi)譜信息，結合精(jing)確質(zhi)(zhi)(zhi)量數(shu)、特(te)征碎片、一(yi)級(ji)(ji)和(he)二(er)(er)級(ji)(ji)色譜-質(zhi)(zhi)(zhi)譜譜圖(tu)確定(ding)酰(xian)基(ji)肉(rou)(rou)堿(jian)結構，共(gong)(gong)鑒定(ding)出733個(ge)酰(xian)基(ji)肉(rou)(rou)堿(jian)。

在(zai)上述基(ji)(ji)(ji)礎上，在(zai)每個大(da)類中根(gen)據結構-保留關系模型(xing)，進一步預測各同系物亞組中未檢測到的酰基(ji)(ji)(ji)肉(rou)堿。最終，一個包含(han)758種酰基(ji)(ji)(ji)肉(rou)堿的數(shu)據庫(ku)(ku)被(bei)建立，該數(shu)據庫(ku)(ku)是迄(qi)今為止最大(da)的酰基(ji)(ji)(ji)肉(rou)堿數(shu)據庫(ku)(ku)。應用建立的LC-MS方法和(he)該數(shu)據庫(ku)(ku)，可分別從人的血漿(jiang)，尿液和(he)小(xiao)鼠的肝臟中檢測出241, 515和(he)222 種酰基(ji)(ji)(ji)肉(rou)堿。

本研究提出的大規模定性策略有用于其他類代謝物定性的潛能，對改善代謝物分析的覆蓋度有極大的促進作用。該研究得到了國家自然科學基金項目和國家重點研究發展計劃的資助。